Alfa-Amilaz Tozusistem adı 1,4- - D-glukan glukan hidrolaz, aynı zamanda sıvılaştırılmış amilaz, sıvılaştırılmış enzim - 1,4-dekstrinaz olarak da bilinir. Su içeriği yüzde 5 ~ yüzde 8 olan sarı-kahverengi katı toz veya sarı-kahverengi ila koyu kahverengi sıvı. Suda ve seyreltik tampon çözeltisinde çözünür, etanolde hemen hemen çözünmez. Biyokimyasal araştırma. Nişastayı hızla sıvılaştırabilir ve düşük moleküler ağırlık oluşturabilir.
1. Gıda işleme: Un endüstrisinde güvenli ve verimli bir geliştirici olarak.Alfa-Amilaz Tozuekmeğin kalitesini artırabilir. A-amilaz, sıvılaştırma ve şekerleştirme özelliğine sahiptir ve genellikle içecek endüstrisinde bir tatlandırıcı olarak kullanılır. Soğuk içeceklerde, soğuk içeceklerin viskozitesi azaltılır ve akışkanlığı arttırılarak yüksek nişastalı soğuk içeceklerin tadı sağlanır. Yeni bir sıvılaştırma enzimi preparasyonu türü olarak yüksek sıcaklıkta a-amilaz, fermantasyon endüstrisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Termal stabilitesi, proteinin kendisinin termal stabilitesi tarafından belirlenir, bu nedenle alkol ve bira mayalama endüstrisinde yaygın olarak kullanılmaktadır.
2. Yem endüstrisi: diyete eksojen a-amilaz eklemek, genç hayvanların nişastayı sindirmesine ve kullanmasına yardımcı olabilir ve büyüme performansı ve yemden yararlanma oranı çok faydalıdır. Broyler diyetine a-amilaz üreten canlı Escherichia coli kültürünün eklenmesi, antibiyotik büyüme destekleyicisi rolünü oynayabilir, bağırsak morfolojisini iyileştirebilir ve üretim performansını iyileştirebilir.
3. Suyla yıkama endüstrisi: Nişasta ucuz, elde edilmesi kolay ve çıkarılması kolay olduğundan, modern elyaf üretim sürecinde iplik kopmasını önlemek için koruyucu bir malzeme olarak kullanılır ve ardından nişastayı seçici olarak çıkarabilen a-amilaz ile işlenir. iplik liflerine zarar vermeden bulamaç haline getirir ve ayrıca nişastayı suda çözünür dekstrin haline getirerek yıkanmasını kolaylaştırır.
4. İlaç endüstrisi: Aspergillus niger a-amilaz aside dirençli olduğu için sindirime yardımcı olacak ilaçlar üretmek, mide asidi ortamına uygun aside dirençli a-amilaz geliştirmek ve sindirime yardımcı maddeler hazırlamak için kullanılabilir.
5. Kağıt endüstrisi: amilaz esas olarak kağıt endüstrisinde kağıt kaplama nişastasının viskozitesini ve konsantrasyonunu iyileştirmek için kullanılır. Macun, kağıdın sertliğini ve mukavemetini artırabilen ve kağıdın sürtünmesini artırabilen iyi bir kağıt kaplamadır. Bununla birlikte, doğal nişasta konsantrasyonu, kağıt boyutlandırma için çok yüksektir, bu nedenle nişastanın a-amilaz tarafından kısmen parçalanmasıyla ayarlanabilir.
Farklı kaynaklardan - Amilazın özelliklerinde belirli farklılıklar vardır ve mantarlar ve bakteriler esas olarak endüstride kullanılır - Amilaz. Şu anda - Amilaz, yem, denatüre nişasta ve nişasta şekeri, fırıncılık endüstrisi, bira mayalama, alkol endüstrisi, fermantasyon, tekstil ve diğer endüstrilerde yaygın olarak kullanılmaktadır. Önemli bir endüstriyel enzimdir.
6. Enzim hazırlama. Aspergillus niger'den yapılan ürünler ağırlıklı olarak nişasta şurubu, alkol, bira, meyve suyu, çikolata şurubu, unlu mamuller, sıvı kahve, şarap, glikoz ve süt ürünlerinde kullanılmaktadır. Aspergillus oryzae'den yapılmıştır, esas olarak nişasta şurubu, alkol, bira, unlu mamuller, süt ürünleri ve et yumuşatma için kullanılır. Mayadan yapılır, esas olarak şeker ve dondurma imalatında ve süt ürünlerinin modifikasyonunda kullanılır. Trichoderma'dan yapılmış olup, ağırlıklı olarak meyve suyu, şarap, bitkisel yağ ve bira üretiminde kullanılmaktadır. Rhizopus oryzae'den yapılmıştır, esas olarak nişasta şurubu, meyve suyu hazırlama, peynir üretimi ve glikoz için bir işleme yardımcısı olarak kullanılır.
7. Bu ürün, bira, pirinç şarabı, sos, monosodyum glutamat ve antibiyotikler üretmek için nişastanın hidrolizini katalize edebilir ve ayrıca glikoz, maltoz ve dekstrin üretimi için kullanılabilir. Çin yönetmeliğine göre fermente şarap, damıtılmış şarap, alkol ve nişasta şurubu üretiminde kullanılabilir ve üretim ihtiyaçlarına göre uygun şekilde kullanılabilir.
8. Nişasta, bebek maması imalatında, tahıl işlemede, bira üretiminde, meyve suyu işlemede, Baijiu üretiminde vb. kullanılan dekstrin şeklinde sıvılaştırılır. En yaygın kullanılan ve tüketilen enzimlerden biridir.
9. Alfa-Amilaz Tozu- 1,4-glukozit bağını hidrolize edebilir, farklı uzunluktaki kısa zincirli dekstrini keyfi olarak kesebilir ve az miktarda düşük moleküler şeker, doğrudan nişasta ve amilopektin düzensiz bir biçimde ayrışır, böylece viskozite nişasta hamuru hızla azalır.
Hazırlanmasıalfa-amilaz tozu:
(1) pxmj19-aph213 taşıyıcısının hazırlanması.
pxmj19-aph213 vektörünün yapım süreci şu şekildedir:
aph213 geni, aph213F ve aph213R primerleri ile xk99e vektöründen büyütüldü. Kullanılan primerler aşağıdaki gibidir:
aph213F:ccggatatcagcttcacgctgccgcaagcac
aph213R:ccgaagcttaattctgtttcctgtgtgaaattg
PCR koşulları şu şekildedir: 4 dk için 95 derece; 95 derece 30s, 62 derece 30s, 72 derece 1dk, 35 döngü; 72 derece 7dk.
Yukarıdaki primerlerin tasarımı, aph213 geninin amplifikasyonu sırasında aph213 geninin yukarı akışında EcoRV kırılma noktasının ve aşağı akışında HindIII kırılma noktasının oluşmasına yol açtı. aph213 geninin nükleotid dizisi DİZİ İD NO: 4'te gösterilmiştir; PCR ürünü geri kazanıldı ve EcoRV ve HindIII ile sindirildi ve daha sonra vektör pxmj19-aph213'ü elde etmek için T4DNA ligazı yoluyla EcoRV ve HindIII ile de sindirilen pxmj-19 vektörüne bağlandı.
pxmj19-aph213 vektörünün büyütme işlemi aşağıdaki gibidir:
A. 50 ml santrifüj tüpüne 3 ml LB kültür ortamı ve 1.5 ul 34 mg/ml kloramfenikol antibiyotik ekleyin;
B. pxmj19-aph213 plazmitini çoğaltmak için pxmj19-aph213 vektörü ile Escherichia coli DH5'i seçin ve yukarıdaki ortama ve kültüre 37 derece ve 230 rpm'de 12 saat boyunca aktarın;
C. pxmj19-aph213 plazmitini, plazmit çıkarma kitinin talimatlarına göre çıkarın.
(2) Bacillus subtilis - Amilaz geninin amplifikasyonu ve modifikasyonu.
Primer AmyF ve AmyR ile Bacillus subtilis genomundan çoğaltılmıştır - Amilaz geni için kullanılan primerler aşağıdaki gibidir:
AmyR:ccgctcgagtcagtggtggtggtggtggtgatggggaagagaaccgcttaag;
AmyF:ccgaagcttgaaaggaggacctaatgtttgcaaaacgattcaaaacc;
PCR koşulları şu şekildedir: 4 dk için 95 derece; 95 derece 30s, 62 derece 30s, 72 derece 2dk, 35 devir; 72 derece 7dk.
Yukarıdaki primerlerin tasarımı, - Amilaz geninin amplifikasyonu sırasında - amilaz geninin yukarısında e3 SD dizisinin oluşturulmasını ve aşağısında histidin etiketinin oluşmasını sağlar. Yukarı akış kısıtlama endonükleaz bölgesi HindIII'tür ve aşağı akış kısıtlama endonükleaz bölgesi XhoI'dir;
(3) Rekombinant vektörün inşası.
PCR ürünü geri kazanıldı ve XhoI ve HindIII ile sindirildi ve daha sonra rekombinant ifade vektörü pxmj19-aph'yi elde etmek için T4 DNA ligaz aracılığıyla XhoI ve HindIII ile de sindirilen pxmj19-aph213 vektörüne bağlandı 213-amy.
(4) Rekombinant bakterilerin inşası.
Rekombinant ekspresyon vektörü pxmj19-aph213-amy, ön amplifikasyon için Escherichia coli'ye aktarıldı. Kültür ortamı, LB ortamıydı ve kloramfenikol konsantrasyonu, 50 ug/ml idi; Ekstraksiyondan sonra, elektriksel dönüşüm yöntemiyle Corynebacterium glutamicum'a aktarıldı ve 30 derecede 30 ug/ml kloramfenikol konsantrasyonu ile LBHIS geri kazanım ortamında kültürlendi.
(5) Kültür rekombinant bakteri ve salgı ifadesi - Amilaz.
Yetiştirilen dönüştürücüleri, kültür için 50 ml ortam içeren 250 ml'lik üçgen bir şişeye aktarın. Ortam, BHI ortamıdır. Kültür koşulu 30 derece, 230 rpm, 48 saattir.
（6） Alfa-Amilaz Tozuamilaz.
A. Rekombinant bakteri kültürünü 12000 rpm'de, 4 derece ve 5 dakikada santrifüjleyerek amilazın süpernatanını elde edin.
B. Şunları içerecektir - Amilaz süpernatanı afinite kromatografisine tabi tutulur. İlk olarak, nikel kolonunu tampon A ile dengeleyin - Amilazın süpernatanı süzüldü ve dengeli nikel kolonuna yüklendi ve daha sonra üç kolonun hacmi tampon A ile temel seviyeye dengelendi; 100mmol B solüsyonu ile elute edin, ayrıştırılan elüatı toplayın ve tüp başına 0,5 ml toplayın;
Tampon A: 300mM NaCl, 20mM Tris, pH8.0 tampon; tampon B: 300mM NaCl, 250mM imidazol, 20mM Tris, pH8.0 tampon.
C. Şunları içerenler için - Amilaz eluatı, saflaştırılmış elde etmek için tuzdan arındırma kolonu boyunca tuzdan arındırılır - - 20 derecede saklanan Amilaz çözeltisi;
Tuzdan arındırma için kullanılan tampon, pH değeri 7.0 olan 50mM PBS tamponudur.
Popüler Etiketler: alfa-amilaz tozu cas 9000-90-2, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toptan satış, satın al, fiyat, toplu, satılık