Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd., Çin'deki 3xflag peptid cas 402750-12-3'ün en deneyimli üreticilerinden ve tedarikçilerinden biridir. Fabrikamızdan satılık toptan toplu yüksek kaliteli 3xflag peptid cas 402750-12-3'e hoş geldiniz. İyi hizmet ve uygun fiyat mevcuttur.
3XFLAG Peptidibiyomedikal araştırmalarda protein ekspresyonu ve saflaştırma işlemlerinde yaygın olarak kullanılan önemli bir peptit işaretleyici dizisidir. Moleküler formül C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. 23 amino asitten oluşan dizisi, kendisine spesifik yapısal özellikler kazandıran üç tekrarlanan Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp motifi içerir.
Belirli solventlerde iyi çözünürlüğe sahiptir. Örneğin DMSO'nun çözünürlüğü yüksektir, bu da onu çözeltideki işlemler ve deneyler için uygun hale getirir. Ayrıca hafif ısıtma yoluyla suda iyi bir çözünme etkisi elde edilebilir. Aynı zamanda bazı özel özelliklere de sahiptir. Örneğin, iyi bir antijeniteye ve reaktiviteye sahiptir ve spesifik anti FLAG antikorlarına bağlanabilir. Bu bağlanma yeteneği, onu immünopresipitasyon gibi deneylerde yaygın olarak uygulanabilir kılar. Anti FLAG antikorlarına rekabetçi bir şekilde bağlanarak, Anti FLAG antikorlarına bağlanan FLAG füzyonuyla eksprese edilen protein, immünopresipitasyon sırasında elüe edilebilir, böylece hedef proteinin lokalizasyonu, tespiti ve saflaştırılması sağlanır.
|
Özelleştirilmiş Şişe Kapakları ve Mantarlar:
|
|
|
Kimyasal Formül |
C120H169N31O49S |
|
Tam Kütle |
2860 |
|
Molekül Ağırlığı |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Element Analizi |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
3XFLAG Peptidiprotein araştırmalarında kullanılan, DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK dizilimi olan 8 amino asitten oluşan bir etikettir. Ana işlevi, protein ekspresyonu ve saflaştırılması için bir belirteç olarak hizmet etmek ve araştırmada uygun ve etkili bir araç sağlamaktır.
1. Afinite saflaştırması:
Protein saflaştırmasında etiket olarak kullanılabilir ve anti FLAG antikorlarına olan yüksek afinitesi sayesinde hedef protein kolaylıkla saflaştırılabilir. Genellikle hedef protein, 3X FLAG PEPTIDE içeren bir ekspresyon vektörüyle hücrelere birlikte transfekte edilir ve daha sonra yüksek saflıkta bir hedef proteini hızlı ve verimli bir şekilde elde etmek için anti FLAG antikorları kullanılarak afinite ile saflaştırılır.
2. İmmünolojik testler:
Yüksek immünojenitesi nedeniyle protein ekspresyonunu ve lokalizasyonunu tespit etmek için kullanılabilir. Spesifik anti FLAG antikorları kullanılarak, hedef proteinlerin ekspresyon seviyesini ve dağılımını hızlı ve doğru bir şekilde tespit etmek için immünoblotlama ve immünofloresan boyama gibi deneysel teknikler gerçekleştirilebilir.
3. Klon filtreleme:
Ayrıca protein klon taramasının rahatlığı için de kullanılabilir. Protein ekspresyon vektörlerinin yapım sürecinde, hedef proteinin gen sekansının 3XFLAG sekansına bağlanması, immün tespit ve diğer yöntemlerle pozitif klonların hedef proteinle taranmasını kolaylaştırabilir, böylece protein fonksiyon araştırma sürecini hızlandırabilir.
4. İmmünopresipitasyon:
Ayrıca protein immünopresipitasyon deneyleri için de kullanılabilir. 3X FLAG PEPTIDE etiketleri içeren proteinlerin anti FLAG antikorlarına bağlanması ve ardından protein A/G agaroz veya manyetik boncuklar gibi adsorpsiyon malzemelerinin kullanılmasıyla, hedef protein ve etkileşimli ortakları, protein etkileşim ağını incelemek için hücre ekstraktlarından seçici olarak çökeltilebilir.
5. İlaç taraması:
İlaç tarama araştırmalarında da kullanılabilir. 3X FLAG PEPTIDE etiketini ilgili proteinle birleştirerek, proteinin yüksek-verimli taraması gerçekleştirilebilir. Bu tarama yöntemi, yeni ilaç hedeflerini keşfetmek, ilaç protein etkileşimlerini değerlendirmek vb. için kullanılabilir.
6. Protein fonksiyon araştırması:
Etiketlerin eklenmesi, proteinlerin doğal yapısını ve işlevini önemli ölçüde etkilemez ve bu nedenle proteinlerin biyolojik işlevlerini, hücre içi lokalizasyonunu, etkileşimlerini ve sinyal iletimini incelemek için kullanılabilir. 3X FLAG PEPTIDE etiketinin kullanıma sunulmasıyla, proteinlerin biyolojik özellikleri üzerinde-derinlemesine araştırmalar yapılabilir, bu da onların hücresel biyoloji ve fizyolojideki etki mekanizmalarının ortaya çıkarılmasına yardımcı olur.
3XFLAG PeptidiDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK dizisine sahip 8 amino asit içeren bir peptittir. Hedef proteinlerin uygun şekilde saflaştırılması, tespiti ve araştırılması için yaygın olarak bir protein etiketi olarak kullanılır. Biyosentez sürecinde kimyasal sentez veya genetik mühendisliği yöntemleriyle hazırlanabilir. Genetik mühendisliği yöntemlerinin ayrıntılı adımları şunlardır:
1. Genleri tasarlayın ve sentezleyin:
Öncelikle 3X FLAG PEPTIDE dizisini içeren yapay bir gen tasarlamak gerekiyor. Bu gen, 3X FLAG PEPTIDE dizisinin yanı sıra uygun promoterleri, sonlandırıcıları ve seçim işaretleyicilerini (antibiyotik tolerans genleri gibi) içermelidir. Genlerin tasarımı, hedef konağın özelliklerini ve ifade ihtiyaçlarını dikkate almalıdır.
2. Gen klonlaması:
Daha sonra tasarlanan yapay genler uygun ifade vektörlerine klonlanacak. Yaygın olarak kullanılan vektörler arasında plazmidler, viral vektörler vb. yer alır. Klonlama işlemi tipik olarak aşağıdaki adımları içerir:
-PCR amplifikasyonu: Hedef gen dizisini şablon DNA'dan amplifiye etmek için polimeraz zincir reaksiyonunun (PCR) kullanılması.
-Sindirim ve bağlantı: PCR ürünleri, kısıtlama endonükleazları kullanılarak ekspresyon vektörleriyle sindirilir ve ardından DNA ligazları ile birbirine bağlanır.
-Dönüşüm: Bağlı ekspresyon vektörünün, rekombinant bir plazmid oluşturmak üzere Escherichia coli gibi bakteriyel konakçılara dönüştürülmesi.
-Tanımlama: Rekombinant plazmitler, hedef genin vektöre başarılı bir şekilde klonlandığını doğrulamak için PCR, enzim sindirimi, DNA dizilimi ve diğer yöntemlerle tanımlandı.
3. İfade hedef proteini:
Oluşturulan ekspresyon vektörünü, memeli hücreleri, maya hücreleri, böcek hücreleri vb. gibi hedef konakçı hücrelere transfekte edin. Hücreler içinde, ekspresyon vektörü mRNA'ya kopyalanır ve ardından proteinlere çevrilir. 3X FLAG PEPTIDE, hedef proteinle birlikte bir protein etiketi olarak eksprese edilecektir.
4. Protein ekstraksiyonu:
Toplam protein ekstraktını elde etmek için transfekte edilmiş hücreleri toplayın ve hücre parçalanması, santrifüjleme ve diğer tedavileri gerçekleştirin.
5. Saflaştırılmış protein:
İmmünopresipitasyon ve afinite kromatografisi gibi afinite saflaştırma teknikleri kullanılarak, 3X FLAG PEPTIDE etiketlerini içeren hedef proteinler toplam ekstrakttan saflaştırıldı. Bu genellikle anti FLAG antikorlarının 3X FLAG PEPTIDE içeren proteinlere bağlanmasını ve daha sonra bunların afinite kromatografi kolonları veya manyetik boncuklar kullanılarak ayrılmasını içerir.
6. Proteinleri tanımlayın:
Saflaştırılmış protein, saflığını ve bütünlüğünü sağlamak için SDS-PAGE jel elektroforezi, immünoblotlama, kütle spektrometresi ve diğer teknolojilerle tanımlandı ve ölçüldü.
Olumsuz reaksiyonlar
Biyomedikal araştırmalarda ve proteinle ilgili deneylerde etiket peptidleri çok önemli bir rol oynamaktadır. Araştırmacılara hedef proteinleri saflaştırma, tespit etme ve bulma konusunda yardımcı olarak protein biliminin gelişimini büyük ölçüde teşvik edebilirler.3XFLAG Peptiditekrarlanan üç FLAG etiket dizisinden oluşan yaygın ve yaygın olarak kullanılan bir etiket peptididir. FLAG etiketi orijinal olarak Hopp ve arkadaşları tarafından tasarlandı. 1988'de geliştirildi ve daha sonra yüksek afinite ve spesifikliğe sahip olan ve spesifik antikorlara bağlanarak daha sonraki izolasyon ve tanımlamayı kolaylaştıran 3XFLAG gibi varyantlara dönüştü. 3XFLAG diğer biyolojik ajanlar gibi deneylerde birçok kolaylıklar getirmiş olsa da bazı olumsuz reaksiyonlara da neden olabilmektedir.
Bağışıklık ile ilgili advers reaksiyonlar
İmmünojenisite
İmmünojenite, bir maddenin vücudun bağışıklık sistemini bir bağışıklık tepkisi oluşturmak üzere uyarma yeteneğini ifade eder. 3XFLAG, ekzojen bir peptit segmenti olarak vücudun bağışıklık sistemi tarafından "kendinden olmayan" bir bileşen olarak tanınabilir ve böylece bir bağışıklık tepkisini tetikleyebilir. 3XFLAG dizisi nispeten kısa olmasına rağmen bazı durumlarda hala B hücrelerini ve T hücrelerini aktive ederek antikor üretimine yol açabilir. Bu antikorlar yalnızca serbest 3XFLAG'a bağlanmakla kalmaz, aynı zamanda 3XFLAG etiketini ifade eden füzyon proteinlerini tanıyıp bunlara bağlanabilir, bu da füzyon proteininin normal fonksiyonunu ve dağılımını etkileyebilir.
Alerjik reaksiyonlar
Alerjik reaksiyon, bağışıklık sisteminin belirli alerjenlere karşı aşırı duyarlı olmasından kaynaklanan anormal bir bağışıklık tepkisidir. Bireysel bireyler, deney veya tedavi için 3XFLAG kullanırken alerjik reaksiyonlar yaşayabilir. Alerjik reaksiyon belirtilerinin şiddeti değişiklik göstermektedir. Hafif vakalarda kaşıntı, döküntü, eritem gibi lokal semptomlar ortaya çıkabilirken, ciddi vakalarda kan basıncında ani düşüş, nefes almada zorluk ve bilinç kaybıyla karakterize anafilaktik şok gibi can güvenliğini ciddi şekilde tehdit eden sistemik alerjik reaksiyonlar tetiklenebilir.
Alerjik reaksiyonlar
Alerjik reaksiyonların mekanizması esas olarak bağışıklık sistemindeki IgE antikorlarıyla ilgilidir. Vücut 3XFLAG ile ilk temas ettiğinde, bağışıklık sistemi onu bir alerjen olarak tanır ve B hücrelerini spesifik IgE antikorları üretmeleri için uyarır. Bu IgE antikorları mast hücrelerinin ve eozinofillerin yüzeyine bağlanır. Vücut 3XFLAG ile tekrar temasa geçtiğinde hücre yüzeyindeki IgE antikorlarına bağlanarak mast hücrelerini ve eozinofilleri histamin ve lökotrienler gibi biyoaktif aracıların salınmasını tetikleyerek alerjik semptomların ortaya çıkmasına neden olur.
Otoimmün hastalık riski
3XFLAG'a uzun süreli veya tekrarlanan maruz kalma, otoimmün hastalıkların gelişme riskini artırabilir. Otoimmün hastalıklar, vücudun bağışıklık sisteminin yanlışlıkla kendi dokularına ve organlarına saldırarak doku hasarına ve işlevsel bozulmaya yol açtığı bir hastalık türünü ifade eder. 3XFLAG, amino asit dizisinin vücudun kendisindeki belirli proteinlerin dizisine benzer olduğu bir moleküler simülasyon mekanizması yoluyla bağışıklık sistemini çapraz reaktif antikorlar ve T hücreleri üretmeye teşvik edebilir.
Bu bağışıklık hücreleri ve antikorlar yalnızca yabancı 3XFLAG'a saldırmakla kalmaz, aynı zamanda yanlışlıkla vücudun normal dokularına da zarar vererek otoimmün hastalıklara yol açar. Örneğin, sistemik lupus eritematozus ve romatoid artrit gibi bazı otoimmün hastalıklar, ekzojen maddelerin neden olduğu otoimmün reaksiyonlarla ilişkili olabilir. Şu anda 3XFLAG'ın doğrudan otoimmün hastalıklara neden olduğunu gösteren net bir kanıt bulunmamasına rağmen, bu potansiyel risk göz ardı edilemez.
Hücresel fonksiyon üzerindeki etki
Bazı deneysel çalışmalarda 3XFLAG'ın yüksek konsantrasyonlarının hücreler üzerinde toksik etkileri olabileceği bulunmuştur. Sitotoksisitenin belirtileri arasında hücre morfolojisindeki değişiklikler, hücre zarı bütünlüğünün bozulması, hücre içi enzim aktivitesinde değişiklikler ve hücre proliferasyonunun inhibisyonu yer alır. Etki mekanizması 3XFLAG ile hücre zarı arasındaki etkileşimle ilişkili olabilir. 3XFLAG'ın güçlü negatif yükü nedeniyle,
elektrostatik etkileşimler yoluyla hücre zarı üzerindeki pozitif yüklü bileşenlere bağlanarak hücre zarının geçirgenliğini ve akışkanlığını değiştirerek hücre içi maddelerin sızmasına veya dışarıdan zararlı maddelerin girişine yol açarak hücrenin normal fizyolojik fonksiyonlarını etkileyebilir. Ek olarak, 3XFLAG ayrıca hücrelerin iç kısmına da girebilir, sinyal yollarına, protein sentezine ve diğer işlemlere müdahale ederek hücre hasarını daha da şiddetlendirebilir.
Hücresel sinyal yolları üzerindeki etkiler
3XFLAG, hücre içi sinyal yollarına müdahale edebilir ve hücrelerin normal fizyolojik aktivitelerini etkileyebilir. Hücresel sinyal yolu, hücrelerin dış uyaranlara yanıt vererek hücre büyümesi, farklılaşması ve apoptoz gibi önemli süreçleri düzenlediği bir dizi moleküler olay için ortak bir terimdir.. 3XFLAG, sinyal yolundaki anahtar moleküllerle etkileşime girerek, sinyal moleküllerinin aktivitesini veya ekspresyon seviyelerini değiştirerek sinyal yollarının normal iletimine müdahale edebilir.
Örneğin hücre yüzeyindeki reseptörlere bağlanarak doğal ligandların reseptörlere bağlanmasını rekabetçi bir şekilde engelleyebilir ve sinyal iletimini bloke edebilir; Alternatif olarak hücreye girebilir ve sinyal transdüksiyon proteinlerine bağlanarak protein fosforilasyonunu, defosforilasyonunu ve diğer modifikasyon süreçlerini etkileyerek sinyal iletimi ve amplifikasyonuna müdahale edebilir. Hücresel sinyal yolaklarına bu müdahale, hücre çoğalması, farklılaşması ve apoptoz gibi süreçleri etkileyerek hücresel işlev bozukluğuna yol açabilir ve bu da doku ve organların normal gelişimi ve işlevi üzerinde olumsuz etkilere neden olabilir.
Hücresel metabolizma üzerindeki etkiler
Hücresel metabolizma, hücreler içinde meydana gelen ve hücresel yaşam aktiviteleri için enerji ve malzeme temeli sağlayan bir dizi kimyasal reaksiyonun genel terimidir. 3XFLAG, hücresel metabolik süreçleri etkileyebilir, hücresel enerji üretimine ve madde sentezine müdahale edebilir. Örneğin, hücrelerde aerobik solunum ve enerji üretiminin ana bölgeleri olan mitokondrinin fonksiyonunu etkileyebilir. 3XFLAG, mitokondriyal solunum zinciri fonksiyonunu ve ATP sentezini etkileyerek, membran üzerindeki proteinler veya lipitlerle etkileşime girerek mitokondriyal membran geçirgenliğini ve potansiyelini değiştirebilir,
yetersiz hücresel enerji kaynağına yol açar. Ek olarak,3XFLAG Peptidiayrıca glikoz metabolizması ve lipit metabolizması gibi hücre içi süreçlere müdahale ederek hücrelerdeki madde sentezi ve ayrışma dengesini etkileyebilir ve hücrelerin normal fizyolojik fonksiyonları üzerinde olumsuz bir etkiye sahip olabilir.
Sıkça Sorulan Sorular
3X BAYRAK nedir?
+
-
3X FLAG Peptidi, 23 amino asit kalıntısından oluşan sentetik bir peptiddir. Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp motifi peptidde üç kez tekrarlanır. C-ucundaki sekiz amino asit, klasik FLAG dizisini oluşturur (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Bayrak-etiketi ile 3xflag arasındaki fark nedir?
+
-
Bayrak-etiketi, immünopresipitasyon, western blot ve immünfloresan uygulamalarında yaygın olarak kullanılan tek bir 8 amino asit dizisidir. Buna karşılık, 3x Flag-etiketi 22 amino asit içerir, bu da ona anti-Flag antikorları için daha büyük bir afinite kazandırır ve onu özellikle protein saflaştırma iş akışları için avantajlı hale getirir.
3X BAYRAK nasıl çözülür?
+
-
Bir stok çözeltisi hazırlamak için, 5 mg/mL konsantrasyonda TBS'de (50 mM Tris-HCl, pH 7,4, 150 mM NaCl ile) çözün. Parçalara ayırın ve –20 derecede saklayın. Tekrarlanan dondurma ve çözme tavsiye edilmez.
Popüler Etiketler: 3xflag peptid cas 402750-12-3, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toptan satış, satın al, fiyat, toplu, satılık