Temel bileşeniIGF 1 LR3 Spreygenetik olarak tasarlanmış bir insülin benzeri büyüme faktörü-1 (IGF-1) analoğu olan IGF-1 LR3'tür (Uzun R3 İnsülin benzeri Büyüme Faktörü-1). Protein parçalanmasını engelleyerek ve kas sentezini teşvik ederek kas kaybını tersine çevirebilir, ancak şu anda klinik öncesi çalışmalarla sınırlıdır. Hayvan deneyleri, IGF-1 LR3'ün kas lifi yapısını geliştirebildiğini göstermiştir ancak insan deneyleri henüz yapılmamıştır. IGF-1 LR3'ün nörotrofik etkisi, aksonal rejenerasyonu ve nöronal hayatta kalmayı destekleyebilir, ancak kan-beyin bariyerine nüfuz etme yeteneğinin daha fazla doğrulanması gerekir. Fibroblast çoğalmasını uyararak yara iyileşmesini hızlandırır ancak hipoglisemi riskine karşı dikkatli olunmalıdır.
|
|
|
IGF 1 LR3 COA
Hammaddeler ve genetik mühendisliği modifikasyonu
ürün anahtarı teknolojileri
Gen kaynağı ve konak seçimi
IGF 1 LR3 Spreygenetik rekombinasyon teknolojisiyle üretilir ve gen dizisi, insan insülini-benzeri büyüme faktörü-1 (IGF-1) temel alınarak değiştirilir. Ekspresyon için konakçı genellikle Escherichia coli (COH türleri gibi) veya memeli hücrelerinden (CHO hücreleri gibi) seçilir; bunların arasında E. coli sistemi, yüksek yoğunluklu fermantasyonda yüksek verimliliği ve düşük maliyeti nedeniyle yaygın olarak kullanılır.
Amino asit dizisi modifikasyonu
R3 mutasyonu: Doğal IGF-1'in üçüncü amino asidi, "R3" işaretleyicisini oluşturan, IGF-1 LR3 ile arginin (Arg) ile değiştirilen glutamik asittir (Glu). Bu mutasyon, insülin benzeri büyüme faktörü bağlayıcı proteinlere (IGFBP'ler) olan afinitesini önemli ölçüde azaltır, serbest konsantrasyonunu 1000 kattan fazla artırır ve biyolojik aktivitesini 2-3 kat artırır.
N-terminal uzantısı: 83 amino asitlik bir zincir yapısı oluşturmak için B zincirinin sonuna 13 amino asit kalıntısı ekleyin (bazı literatürde 93 amino asitten bahsedilir; bu, saflaştırma süreçlerindeki veya tespit yöntemlerindeki farklılıklardan kaynaklanabilir), bu da işlevini daha da optimize eder.
Fermantasyon ve saflaştırma süreci
fermantasyon süreci
Yüksek yoğunluklu fermantasyon: Escherichia coli ekspresyonu 42 derecede ısı şoku ile indüklenir ve fermantasyon tankı 50L kapasiteye ulaşabilir. Hedef protein toplam bakteriyel proteinin %30-40'ını oluşturur.
Kültür ortamının optimizasyonu: Metabolik yan ürünlerin (asetik asit gibi) birikimini kontrol edin ve toplu yetiştirme stratejisini besleyerek ürün saflığını iyileştirin.
Arıtma süreci
Kaba ve Saf Aşama:
İyon değiştirme kromatografisi: Saflığı %90'ın üzerine çıkarmak için protein yükü farkı ayrımından yararlanılır.
Hidrofobik etkileşim kromatografisi: safsızlıkları daha da gidererek %95'in üzerinde bir saflığa ulaşır.
Saf aşama:
Moleküler dışlama kromatografisi (SEC-HPLC): Hedef proteinleri dimerlerden veya oligomerlerden %95'e eşit veya daha büyük bir saflıkla ayırın (SDS-PAGE tarafından tespit edildi).
Ultrafiltrasyon konsantrasyonu: Tamponu PBS (pH 7,4) sistemiyle değiştirirken, teğetsel akış filtreleme teknolojisini kullanarak proteini konsantre edin.
Terminal filtreleme: Sterilliği sağlamak amacıyla sterilizasyon için 0,22 μm filtre membranı kullanın.
kalite kontrol
Aktivite doğrulaması: Biyolojik aktivite, MCF-7 insan meme kanseri hücrelerinin serumsuz proliferasyon testi ile ölçüldü ve ED50 değeri 1,5 ng/mL'den az veya buna eşitti.
Saflık testi: SDS-PAGE ve SEC-HPLC birleşik algılama, saflık %95'e eşit veya daha büyük.
Safsızlık kontrolü: endotoksin içeriği 10 EU/mg'ye eşit veya daha az, konakçı protein kalıntısı %0,005'e eşit veya daha az, eksojen DNA kalıntısı 10 ng/mg'ye eşit veya daha az.
Hazırlık süreci ve stabilite
Dondurarak kurutma koruyucu formülü
Dondurarak-kurutma koruyucuları olarak %8 trehaloz veya %5 mannitol kullanılarak %0,01 Tween 80 (çözünürleştirici) ile birleştirilen sıvı protein, dondurarak-kurutma teknolojisi yoluyla nem içeriği %3'ten az olan beyaz toza dönüştürülür.
Stabilite garantisi
Uzun süreli depolama
Dondurularak kurutulmuş toz -20 derece ila -80 derece arasında 36 ay saklanabilir ve sulandırıldıktan sonra 6 ay boyunca -20 derece ila -80 derece, 7-10 gün boyunca 2 derece ila 8 derece arasında steril koşullar altında yerleştirilebilir.
Taşıma koşulları: Mavi buz paketleri, taşıma için soğutulur, sıcaklığın 2-8 derecede tutulması sağlanır ve tekrarlanan donma ve çözülmenin önüne geçilir.
Üretim ekipmanı ve GMP uyumluluğu
Çekirdek Ekipman
Fermantasyon sistemi: 50L tam otomatik fermantasyon tankı (pH, çözünmüş oksijen, sıcaklık çevrimiçi izleme sistemi ile donatılmıştır).
Saflaştırma sistemi: AKTA Avant protein saflaştırıcısı (otomatik kromatografik ayırmayı destekler).
Hazırlama ekipmanı: Mini Sprey Kurutucu B-290 (püskürtmeli kurutucu) veya dondurarak kurutma makinesi (toz hazırlama için).
Analitik araçlar: HPLC-MS (moleküler ağırlık onayı), dinamik ışık saçılımı analizörü (partikül boyutu dağılımı tespiti), enzim-bağlantılı immünosorbent tahlili (ELISA).
GMP uyumluluğu
Üretim ortamı "İlaçlar için İyi Üretim Uygulamaları (2010'da revize edildi)" ile uyumludur ve bakteriyel endotoksinler ve konakçı protein kalıntıları gibi göstergeleri sıkı bir şekilde kontrol eder.
COA (Kalite Sertifikası), MSDS (Güvenlik Veri Sayfası) ve düzenleyici destek belgeleri dahil olmak üzere eksiksiz kalite belgeleri sağlayın.
IGF 1 LR3 Sprey, glial hücrelerin metabolik fenotipini ve fonksiyonel farklılaşmasını bozar
IGF 1 LR3 Spreyyapay olarak değiştirilmiş uzun etkili insülin-benzeri bir büyüme faktörü olan IGF-1 LR3 bileşenini içeren bir preparattır. Doğal IGF-1'den daha yüksek aktiviteye, vücutta daha uzun bir yarı ömre ve çoğu hücrenin bölünmesini, göçünü ve farklılaşmasını teşvik edebilen daha iyi büyümeyi teşvik edici etkilere sahiptir. Tıp alanında IGF-1 LR3, benzersiz biyolojik özelliklerinden dolayı geniş ilgi görmüş ve çeşitli hastalıkların tedavi edici potansiyelini araştırmak için araştırılmıştır.
Glial hücreler, mikroglia, astrositler ve diğerleri de dahil olmak üzere merkezi sinir sisteminin önemli bir bileşenidir. Sinir sisteminin normal fonksiyonunun sürdürülmesinde, nöronların hayatta kalmasının desteklenmesinde ve bağışıklık tepkilerine katılmada vazgeçilmez bir rol oynarlar. Glial hücrelerin metabolik fenotipi ve fonksiyonel durumu, sinir sisteminin sağlığı ile yakından ilişkilidir ve metabolizmalarını ve fonksiyonlarını etkileyen herhangi bir faktör, sinir sistemi üzerinde önemli bir etkiye sahip olabilir.
Glial hücrelerin metabolik fenotipi ve işlevi
Glia hücrelerinin türleri ve dağılımı
Merkezi sinir sistemindeki glial hücreler esas olarak mikroglia ve astrositleri içerir. Mikroglia, merkezi sinir sistemindeki bağışıklık hücreleridir ve beyin ve omurilik boyunca yaygın olarak dağılmıştır. Sinir sisteminin "koruyucuları" olarak hareket ederler, çevredeki ortamdaki değişiklikleri sürekli olarak izlerler ve sinir sisteminin bağışıklık homeostazisinin korunmasında önemli bir rol oynarlar. Astrositler, çeşitli form ve işlevlere sahip, merkezi sinir sisteminde en bol bulunan glial hücre türüdür. Astrositler, süreçleri aracılığıyla nöronlar, kan damarları vb. ile yakın bağlantılar kurar, kan-beyin bariyerinin oluşumuna katılır, nöronlara besin desteği sağlar, nörotransmitterlerin alımını ve metabolizmasını düzenler ve nöronların normal fonksiyonu ve sinir sinyallerinin iletimi üzerinde önemli bir etkiye sahiptir.
Normal glial hücrelerin metabolik fenotipi
Normal fizyolojik koşullar altında glial hücrelerin spesifik metabolik fenotipleri vardır. Mikroglialar dinlenme halindeyken bağışıklık gözetim fonksiyonlarını yerine getirirler ve metabolik aktiviteleri nispeten düşüktür, esas olarak enerji elde etmek için oksidatif fosforilasyon yolaklarına dayanırlar. Patojen istilası, doku hasarı vb. tarafından uyarıldığında mikroglialar aktive olur ve metabolik fenotipleri önemli değişikliklere uğrar, glikolizin hakim olduğu bir metabolik moda doğru kayar, dış zorluklarla başa çıkmak için hızla enerji ve biyoaktif moleküller üretir. Normal koşullar altında astrositlerin metabolik aktivitesi, nöronların metabolik ihtiyaçlarına göre uyarlanır. Glikozu sindirerek aerobik oksidasyon yoluyla kendilerine ve nöronlara enerji desteği sağlarlar. Astrositler aynı zamanda glutamat glutamin döngüsüne de katılarak nöronlar tarafından salınan glutamatı glutamine dönüştürür ve tekrar glutamatı sentezlemek için nöronlara geri taşırlar. Bu süreç nörotransmitter dengesini ve normal nöron fonksiyonunu korumak için çok önemlidir.
Glia hücrelerinin fonksiyonları
Glial hücrelerin merkezi sinir sisteminde birçok önemli işlevi vardır. Bağışıklık hücreleri olarak mikroglia, patojenleri, hasarlı hücreleri ve anormal protein agregatlarını tanıyıp ortadan kaldırabilir ve nöroinflamatuar yanıtların düzenlenmesine katılabilir. Nöral gelişim sırasında mikroglialar aynı zamanda sinaptik budamaya da katılarak nöral devrelerin normal bağlantılarının şekillendirilmesine yardımcı olur.
Astrositlerin işlevleri daha kapsamlıdır. Sadece nöronlar için besinsel ve yapısal destek sağlamakla kalmazlar, aynı zamanda nörotransmiterlerin salınımının ve alımının düzenlenmesine de katılarak nörotransmiter homeostazisini korurlar. Ayrıca astrositler serebral kan akışını düzenler ve kan damarlarıyla etkileşime girerek kan-beyin bariyerinin fonksiyonunun korunmasına katkıda bulunur, sinir sistemini çevredeki zararlı maddelerden korur.
IGF-1 LR3 Spreyinin glial hücrelerin bozulmuş metabolik fenotipi üzerindeki etkisi
Metabolik yollardaki değişiklikler
IGF-1 LR3 Spreyindeki IGF-1 LR3, glial hücrelerin yüzeyindeki IGF-1 reseptörlerine bağlanarak aşağı yöndeki sinyal yollarını aktive edebilir, böylece glial hücrelerin metabolik yollarını etkileyebilir. Enerji metabolizması açısından IGF-1 sinyal yolunun aktivasyonu, glial hücrelerin oksidatif fosforilasyondan glikolize geçişini destekleyebilir. Normal koşullar altında oksidatif fosforilasyon, hücrelerin yüksek verimlilikle ancak nispeten yavaş bir hızla enerji üretmesinin ana yoludur; Glikoliz daha az enerji üretmesine rağmen kısa sürede hızlı bir şekilde enerji sağlayabilir.
IGF-1 LR3, glial hücreler üzerinde etki gösterdiğinde, glikolitik enzimlerin ekspresyonunu yukarı doğru düzenleyebilir ve PI3K/Akt ve Ras/MAPK gibi sinyal yollarını aktive ederek glikolitik aktiviteyi artırabilir. Bu metabolik yolun değişmesi, glial hücrelerin enerji sağlama modunda bir "bozulmaya" yol açabilir, bu da farklı fizyolojik veya patolojik durumlarla karşı karşıya kaldığında enerji metabolizmasının anormal düzenlenmesine neden olabilir.
Popüler Etiketler: igf 1 lr3 sprey, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toptan satış, satın al, fiyat, toplu, satılık