Tiazolil Mavi CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd., Çin'deki tiazolil mavi cas 298-93-1'in en deneyimli üreticilerinden ve tedarikçilerinden biridir. Fabrikamızdan satılık toptan toplu yüksek kaliteli tiazolil mavi cas 298-93-1'e hoş geldiniz. İyi hizmet ve uygun fiyat mevcuttur.

Tiazolil mavisiDaha çok MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür) olarak bilinen bileşik, büyüleyici bir ikiliği barındırır; hem hücre biyolojisinde hayati bir araç, hem de bukalemun kimyasal tuhaflığıdır. Bu sarı kristalli toz, canlı hücrelerde şaşırtıcı bir metamorfoza uğrar: mitokondriyal redüktazlar tetrazolyum halkasını böler ve onu çözünmez bir mor formazan çökeltisine dönüştürür; görsel olarak o kadar çarpıcı bir reaksiyon ki, hücre canlılığını ölçmek için altın standart haline geldi. Ancak laboratuvar tezgahının ötesinde, MTT daha ezoterik davranışları ortaya çıkarıyor; kristal yapısı, mikroskop altında tuhaf "balıksırtı" desenleri oluştururken, redoks özellikleri, ışığın belirli dalga boylarına maruz kaldığında egzotik fotokimyasal reaksiyonlara katılmasına izin verir. İlginç bir şekilde bileşik, "metakromazi" adı verilen, konsantrasyona ve moleküler çevreye bağlı olarak farklı renkler ortaya çıkaran nadir bir fenomeni sergiliyor; bu özellik, bir zamanlar tekstil kimyagerleri tarafından "akıllı" boyalar oluşturmak için kullanılmıştı. Son araştırmalar, bazı solunum zinciri enzimlerinin zayıf bir inhibitörü olarak beklenmedik rolünü ortaya çıkardı; bu, her yerde bulunan bu analiz reaktifinin, bilim adamlarının onu incelemek için kullandığı metabolik süreçleri incelikli bir şekilde etkilediğini ima ediyor. MTT çözeltileri, organik çözücüler içinde çözündüğünde, fiziksel kimyagerleri şaşırtan olağandışı bir floresans söndürme etkisi sergiliyor ve bu durum, hala tam açıklamayı bekleyen karmaşık moleküller arası etkileşimleri akla getiriyor.

Tiyazolil Mavisi,Kimyasal adı, önemli bir organik bileşik olan MTT olarak kısaltılan 3-(4,5-dimetil-2-tiyazol)-2,5-difeniltetrazolyum bromürdür. Mosman'ın 1983 yılında hücre büyümesini ve hayatta kalmasını belirlemek için MTT boyamasının kullanımını ilk kez bildirmesinden bu yana, MTT yaşam bilimleri, tıbbi araştırmalar ve ilaç geliştirme gibi alanlarda yaygın olarak uygulanmıştır. Aşağıda amacının ayrıntılı bir açıklaması bulunmaktadır:

Hücre Biyolojisi Araştırmalarında Uygulama

 

MTT, hücre proliferasyonunu belirlemek için kullanılan klasik yöntemlerden biridir. Hücre kültürü sırasında, canlı hücre mitokondrisindeki süksinat dehidrojenaz gibi dehidrojenazlar, eksojen MTT'yi hücrede biriken çözünmeyen mavi mor kristal formazana indirgeyebilir. Ölü hücreler bu indirgeme kabiliyetinden yoksundur ve bu nedenle formazan üretmezler. Formazanın hücrelerde çözülmesi ve bir enzim- bağlantılı immünosorbent tahlili (ELISA) okuyucusu kullanılarak belirli dalga boylarında (490 nm veya 562 nm gibi) ışık absorpsiyon değerinin ölçülmesiyle, canlı hücrelerin sayısı dolaylı olarak yansıtılabilir. Belirli bir hücre sayısı aralığında, oluşan MTT kristallerinin miktarı hücre sayısıyla orantılıdır, dolayısıyla hücre proliferasyonu ölçülen absorbans değerine (OD değeri) göre belirlenebilir.

Hücre Biyolojisi Araştırmalarında Uygulama

 

MTT ayrıca ilaçların veya diğer tedavi yöntemlerinin (radyasyon ışınlaması gibi) in vitro kültürlenmiş hücreler üzerindeki toksisitesini belirlemek için de kullanılabilir. Tedavi grubu ile kontrol grubunun OD değerleri karşılaştırılarak ilaçların veya tedavi yöntemlerinin hücre aktivitesi üzerindeki etkisi değerlendirilebilir. OD değeri ne kadar büyük olursa hücre aktivitesi o kadar güçlü olur; Aksine, hücre aktivitesinin ne kadar zayıf olduğunu veya hücre toksisitesinin o kadar fazla olduğunu gösterir. Bu yöntemin ilaç taraması, toksikoloji araştırmaları ve diğer alanlarda geniş uygulamaları vardır. MTT temel olarak hücre çoğalmasını ve sitotoksisiteyi ölçmek için kullanılsa da bazı durumlarda hücre apoptozunun araştırılmasına yardımcı olmak için de kullanılabilir. Hücre apoptoz süreci sırasında hücre içindeki enzim aktivitesi değişir ve bu da MTT'nin azaltma yeteneğini etkileyebilir. Apoptotik hücreler ile normal hücreler arasındaki OD değerleri arasındaki fark karşılaştırılarak hücre apoptozunun oluşumu ön olarak belirlenebilir. Ancak MTT'nin hücre apoptozunu tespit etmek için özel bir yöntem olmadığı ve sonuçlarının diğer apoptoz tespit yöntemleriyle birlikte kapsamlı bir şekilde analiz edilmesi gerektiği unutulmamalıdır.

İlaç geliştirmede uygulama

 

İlaç geliştirme sürecinde, MTT tahlili yaygın olarak kullanılan yüksek{0}}verimli bir ilaç tarama yöntemidir. Test ilacının hücrelerle birlikte inkübe edilmesi ve hücre aktivitesindeki değişiklikleri ölçmek için MTT tahlilinin kullanılmasıyla potansiyel aktif ilaç molekülleri hızlı bir şekilde taranabilir. Bu yöntem, kolay kullanım, güvenilir sonuçlar ve yüksek verim avantajlarına sahiptir ve ilaç geliştirmenin erken aşamasında önemli uygulama değerine sahiptir. MTT tahlili aynı zamanda ilaçların etki mekanizmasını incelemek için de kullanılabilir. Farklı ilaç tedavisi koşulları altında hücre aktivitesindeki değişikliklerin karşılaştırılması yoluyla ilaçların hücre proliferasyonu ve apoptoz gibi süreçler üzerindeki etkisi ön olarak belirlenebilir. Western blot ve akış sitometrisi gibi diğer moleküler biyoloji tekniklerini birleştirerek ilaçların hedefleri ve sinyal yolları daha da ortaya çıkarılabilir. İlaç güvenliği değerlendirmesinde, ilaçların hücreler üzerindeki toksik etkilerini değerlendirmek için MTT testi kullanılabilir. İlaç tedavisinden sonra hücrelerin OD değerindeki değişiklikleri ölçerek ilacın sitotoksisiteye sahip olup olmadığını ve toksisite gücünü belirlemek mümkündür. Bu, klinik öncesi araştırmalara ve ilaçların klinik uygulamalarına rehberlik etmek açısından büyük önem taşımaktadır.

MTT'nin diğer alanlarda uygulanması

 

İmmünolojik araştırmalarda, lenfositlerin çoğalma yeteneğini belirlemek için MTT testi kullanılabilir. Lenfositlerin antijenler veya bağışıklık uyarıcılarla birlikte inkübe edilmesi ve MTT tahlili kullanılarak hücre aktivitesindeki değişikliklerin ölçülmesi yoluyla, lenfositlerin bağışıklık tepkisi yeteneği değerlendirilebilir. Bu yöntemin aşı geliştirme, immünoterapi ve diğer alanlarda geniş uygulamaları vardır. Onkoloji araştırmalarında, tümör hücrelerinin çoğalma aktivitesini ve ilaç duyarlılığını belirlemek için MTT testi kullanılabilir. Farklı ilaç tedavisi koşulları altında tümör hücrelerinin OD değerlerindeki değişiklikler karşılaştırılarak, tümör hücreleri üzerinde inhibitör etkisi olan ilaç molekülleri taranabilir ve bunların anti-tümör etkileri değerlendirilebilir. Bu, tümörlerin klinik tedavisine rehberlik etmek açısından büyük önem taşımaktadır. Çevresel toksikoloji araştırmalarında, çevresel kirleticilerin hücreler üzerindeki toksik etkilerini değerlendirmek için MTT testi kullanılabilir. Hücreleri farklı konsantrasyonlarda kirletici maddelerle birlikte inkübe ederek ve MTT tahlilini kullanarak hücre aktivitesindeki değişiklikleri ölçerek, kirletici maddelerin toksisitesi ve etki mekanizması belirlenebilir. Çevreyi kirleten maddelerin ekolojik risklerinin değerlendirilmesi ve çevre koruma politikalarının oluşturulması açısından bu büyük önem taşıyor. 

Deneysel adımlartiyazolil mavisiyöntem:

1: Tripsin, logaritmik fazdaki hücreleri sindirir, santrifüj eder ve hücre süspansiyonu yapmak için sonlandırıldıktan sonra bunları toplar ve konsantrasyonunu hücre sayısı x 104/ml ile 5-10'a ayarlar. Yeni başlayanlar için hücrelerin 5-10 × 104/ml'ye ulaşması gerekiyor çoğu zaman nereden başlayacağını bilemiyor. Başlangıçta hücre sayısını belirlemek için size basit bir yöntem sunmak için buradayım.

Örnek olarak hücre kültürü için yaygın olarak kullanılan 25cm2'yi alın:

1) Hücre yoğunluğu yaklaşık %80~%90'dır (aşağıdaki şekil hücrelerin %80~%90 yoğunluktaki yaklaşık durumunu gösterir). Sindirim ve santrifüjden sonra süpernatantı çıkarın ve karıştırmak için 3 ml ortam ekleyin.

2) Yeni bir 15 ml'lik steril santrifüj tüpü alın (96 kuyulu plakanın bir sonraki aşılama adımı için) ve yaklaşık 9 ml ortamla doldurun

3) İlk adımda hazırlanan 3ml'lik hücre süspansiyonundan 1ml alın, üstteki tüpe ekleyin ve karıştırdıktan sonra hücreleri sayın. Şu anda, genellikle 5-10 veya daha az × 104/ml'dir; bu, hücre sayma panosundaki 4 hücrede hücre başına 5-10 hücreye eşdeğerdir (aşağıdaki şekle bakın); Konsantrasyon yeterli değilse sayım sonucuna göre hücre süspansiyonu eklenecek ve her damla 50ul olarak hesaplanacaktır.

4) Hücre sayısı deneyin farklı amaçlarına göre ayarlanmalıdır. Örneğin, genel hücre çoğalması deneyinde, oyuk başına 2000 hücre (2 x 104/ml hücre süspansiyon yoğunluğuna eşdeğer), oyuk başına 5000 ila 10000 hücre (5 x 104/ml hücre süspansiyon yoğunluğuna eşdeğer) kullanılabilir. Ayrıca hücre sayısının büyüme hızı gibi kendi özelliklerine göre de belirlenmesi gerekir. Örneğin daha hızlı büyüyen hücrelerin yoğunluğu biraz daha küçük olabilir.

2. Hücre süspansiyonunu hazırladıktan sonra yavaşça karıştırın ve her deliğe 100 ul ekleyin, böylece test edilecek hücrelerin yoğunluğu 5000-10000/delik olur (kenar deliği steril PBS ile doldurulur).

L Not: Hücreler karıştırıldıktan sonra çökelmeye devam edeceğinden, aşılamanın hücre yoğunluğunun delikler arasında tam olarak aynı olmasını sağlamak için aşılama işlemi sırasında her altı delikte bir karıştırma gibi tekrar tekrar karıştırmak gerekir; bu, MTT sonuçları için çok önemlidir.

3. Aşılanmış hücre kültürü plakasını, hücre tek katmanı deliğin tabanıyla (96 delikli düz plaka) kaplanıncaya kadar yetiştirme için inkübatöre koyun ve ilacı konsantrasyon gradyanı ile ekleyin. Prensip olarak ilaç, hücre duvara yapıştırıldıktan sonra veya iki saat veya yarım gün sonra eklenebilir, ancak ilacı genellikle bir önceki günün öğleden sonra ve ertesi sabah ekliyoruz. Genellikle 5-7 gradyan, delik başına 100ul ve 3-5 çoklu delik ayarlanır. 6 olarak ayarlanması tavsiye edilir, aksi halde gerçek durumu yansıtması zordur. Aşağıdaki şekil 96 delikli plaka için referans adımı olarak kullanılabilir.

L Dozajlama için bazı kişiler, bir konsantrasyon gradyanı oluşturmak üzere ilaçları 96 kuyucuklu plakalara farklı hacimlerde doğrudan ekler. Ancak bence EP tüpünde farklı konsantrasyonlarda ilaç karıştırmaya çalışmalıyız, daha sonra 96 ​​kuyulu plakadan kültür süpernatanını çıkarmalı (bu bir boşaltma tabancasıyla emilebilir) ve farklı ilaç konsantrasyonları içeren 100 ul kültür ortamı eklemeliyiz, bu da ilaç konsantrasyonunun doğruluğunu sağlayabilir. Ayrıca, eğer bu yöntem kullanılıyorsa, ilaç eklemeden önce 96 kuyucuklu plaka kültür solüsyonunun tamamını emmeyin. 96 kuyulu plakanın kuruması nedeniyle hücre ölümünü önlemek için numunelerin bir kısmını emdikten hemen sonra eklemelisiniz.

%4,5 CO2 ile 37 derecede 16-48 saat inkübe edin ve ters mikroskop altında ilacın etkisini gözlemleyin. Aşağıdaki şekil sitotoksisitenin tipik bir ilaç gradyanını göstermektedir.

4. Her bir kuyucuğa 10ul MTT solüsyonu (5 mg/ml, yani %. 0.5 MTT) ekleyin ve 4 saat boyunca kültüre devam edin. İlaç reaksiyona girebilirsetiyazolil mavisikültür solüsyonu santrifüj sonrası atılabilir ve MTT içeren kültür solüsyonu PBS ile 2-3 kez yıkandıktan sonra eklenebilir.

5. Kültürü durdurun ve çözünme ve kristalleşmeye hazırlanın.

Tiyazolil MavisiÇince adı Metil Mavisi olan, tıpta, biyolojide ve kimyada yaygın olarak kullanılan önemli bir organik bileşiktir. Tıpta sıklıkla nitrit zehirlenmesi, siyanür zehirlenmesi vb. tedavisinde kullanılır ve ayrıca bazı hastalıkların tanı ve adjuvan tedavisinde de kullanılır; Biyolojik araştırmalarda hücre veya dokuların etiketlenmesi için boyama maddesi olarak kullanılabilir. Ancak birçok ilaç gibi metilen mavisinin de kullanım sırasında bir dizi yan etkisi olabilir:

Sindirim sistemi yan etkileri

Bulantı ve kusma metilen mavisinin yaygın sindirim sistemi yan etkilerinden biridir. Metilen mavisi vücuda girdiğinde mide-bağırsak mukozasını uyararak bulantıya ve hatta ciddi vakalarda kusmaya neden olabilir. Bu belirti, intravenöz enjeksiyon hızı çok hızlı olduğunda veya dozaj çok büyük olduğunda daha belirgindir. Örneğin bazı klinik vakalarda hastalar metilen mavisinin hızlı intravenöz enjeksiyonundan kısa bir süre sonra ciddi bulantı ve kusma yaşayabilir, bu da onların konforunu ve tedavi deneyimini etkiler. Bazı hastalarda metilen mavisi kullanımı sonrasında karın ağrısı yaşanabilir ve ağrının derecesi bireysel farklılıklara göre hafif rahatsızlıktan daha şiddetli ağrıya kadar değişebilir.

Aynı zamanda metilen mavisinin bağırsak peristaltizmi ve sindirim fonksiyonuna müdahale etmesi nedeniyle anormal bağırsak hareketine ve sindirim sıvısı salgısında değişikliklere yol açabilen ishal de buna eşlik edebilir. Uzun süreli veya sık görülen karın ağrısı ve ishal, yalnızca hastanın besin emilimini ve fiziksel sağlığını etkilemekle kalmaz, aynı zamanda başka komplikasyonlara da yol açabilir.

Üriner sistem yan etkileri

Metilen mavisi kullanımından sonra idrar rengi maviye döner, bu durum metilen mavisi ve metabolitlerinin böbrekler yoluyla idrarla atılmasından kaynaklanır. Genel olarak idrar rengindeki bu değişiklik geçicidir ve fiziksel sağlık üzerinde ciddi bir etkisi olmayacaktır. Ancak üriner sistem hastalıkları olan hastalar gibi bazı özel durumlarda idrar rengindeki değişiklikler hastalığın tanısına engel olabilir ve doktorların diğer muayene göstergelerini temel alarak kapsamlı bir analiz yapması gerekir. İdrar yaparken bazı hastalar üretral açıklıkta batma hissi hissedebilirler.

 

Bunun nedeni metilen mavisinin üretral mukoza üzerindeki uyarıcı etkisinden kaynaklanabilir, özellikle idrar konsantrasyonu yüksek olduğunda veya idrara çıkma sırasında üretral mukoza ovulduğunda batma hissi daha belirgin olacaktır. Bu semptom hastalarda belirli rahatsızlıklara neden olabilir ve günlük yaşamlarını etkileyebilir.

Nörolojik yan etkiler

Baş dönmesi ve baş ağrısı metilen mavisinin sık görülen nörolojik yan etkileridir. Metilen mavisi kullandıktan sonra hastalar baş dönmesi ve kafa karışıklığı hissedebilir veya kafada şişlik, ağrı gibi rahatsızlıklar yaşayabilir. Bu belirti hastanın dikkatini ve düşünme yeteneğini etkileyebilir, iş ve yaşam verimliliğini azaltabilir. Baş dönmesi ve baş ağrısının ortaya çıkması, metilen mavisinin beyindeki kan damarları ve sinirler üzerindeki etkileriyle ilişkili olabilir ve spesifik mekanizmanın hala daha fazla araştırmaya ihtiyacı vardır. Nadir durumlarda metilen mavisi uyuşukluk, koma vb. bilinç bozukluklarına neden olabilir.

Bunun nedeni genellikle metilen mavisinin aşırı kullanımı veya hastaların ilaca aşırı duyarlı olması ve merkezi sinir sisteminin ciddi şekilde engellenmesine neden olmasıdır. Bilinç bozuklukları hastanın can güvenliğini tehlikeye atabilecek ve acil kurtarıcı tedavi gerektirebilecek ciddi bir yan etkidir.

1. Tiyazolil mavi tetrazolyum bromürün kullanımı nedir?

Tiazolil Mavi Tetrazolyum Mavisi (MTT), hücre çoğalmasının ölçümünde kullanılabilir. MTT, canlı hücrelerin mitokondriyal dehidrojenazları tarafından koyu mavi, suda-çözünmeyen MTT formazana dönüştürülen sarımsı bir çözelti üretir.

2.Tiyazolil Mavinin saklanması güvenli midir?

Sıcaklık Koşulları: Tozu kapatın ve raf ömrünü etkili bir şekilde uzatabilen (genellikle 1-2 yıl) donma koruması için -20 derecelik bir buzdolabında saklayın; Kısa süreli depolama için (1 ay içinde), geçici olarak 4 derecelik soğutma koşullarında saklanabilir.

Işığa-ve Neme-geçirmez Gereksinimler: MTT tozu ışığa-hassastır ve kahverengi reaktif şişelerinde veya kalay folyoya sarılmış şeffaf şişelerde saklanmalıdır. Bu arada, tozun nemi emmesini ve topaklanmasını önlemek için kurutucu maddeler (örneğin silika jel) eklenmelidir.

3.Tiazolil Mavi rengi değişecek mi?

Çözeltinin mavi-mor bir çökelti göstermesi veya renginin koyulaşması, oksitlendiğini ve kullanılmaya devam edilemeyeceğini gösterir.
Çözeltiyi oda sıcaklığında veya aydınlık bir ortamda yerleştirmekten kaçının çünkü çabuk bozulabilir.

Popüler Etiketler: tiazolil mavi cas 298-93-1, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toptan satış, satın al, fiyat, toplu, satılık