Iptg tozulokal anestezik etki alanı için kullanılabilir, ameliyat sonrası yara ağrısını gidermek ve ülser ağrısı için-yayıcı bir madde olarak uygulanır. Mavi ve beyaz nokta taramada yaygın olarak kullanılan moleküler biyolojik reaktifler ve bakterilerde IPTG kaynaklı protein ekspresyonu. IPTG, tam adı izopropil- - D-tiyogalaktosid, CAS 367-93-1, molekül formülü C9H18O5S, molekül ağırlığı 384,37 Dalton, küçük moleküllü bileşiklere aittir. Suda çözünürlüğü düşük fakat organik solventlerde daha iyi çözünürlüğe sahip beyaz veya hemen hemen beyaz toz. Moleküllerde iyonik gruplar vardır, dolayısıyla suda belirli bir iletkenliğe sahiptirler. Oda sıcaklığında kararlıdır, ancak yüksek sıcaklık veya güçlü asit ve alkali koşulları altında ayrışması kolaydır. Belirgin bir koku yoktur ancak kullanım sırasında hafif organik bileşik kokusu yayılabilir. Bakterilerde protein ekspresyonunu indüklemek için kullanılan yaygın olarak kullanılan bir indükleyicidir. Tıbbi teşhiste IPTG, numunelerdeki belirli molekülleri veya dokuları tespit etmek için floresan prob veya kromojenik ajan olarak görev yapabilir. IPTG, hedef moleküllerle birleşerek floresan sinyaller veya renk değişiklikleri üreterek hastalık teşhisine güçlü destek sağlayabilir.
|
Morfolojik |
Kristal Toz |
|
Renk |
Beyaz |
|
Erime noktası |
105 derece C |
|
Kaynama noktası |
350,9 derece C (kaba tahmin) |
|
Yoğunluk |
1,3329 (kaba tahmin) |
|
Saklama koşulları |
2-8 derece C |
|
çözünürlük alkol |
çözünür çözünür 40 kısım solvent |
|
Asitlik katsayısı (pKa) |
13,00 ± 0,70 (Tahmini) |
|
Suda çözünür |
50 mg / ml |
|
alevlenme noktası |
197.8 derece |
|
çözünürlük |
1.6g/l |
|
Buhar yoğunluğu |
5.21 (havaya karşı) |
|
Kırılma indeksi |
1.5060 (tahmini) |
|
|
|
Iptg tozu,Fiziksel parametreler, Mp. : 114 ~ 121 derece C, Kullanım tanımı, Yaygın moleküler biyoloji reaktifleri, genellikle mavi-beyaz taramada ve bakterilerde IPTG-indüklenen protein ekspresyonunda kullanılır. , Ambalaj özellikleri , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Saklama koşulları
2-8 derece buzdolabında, ışıktan korunmuş, Tehlike tanımı, Tehlike kodu : Xi , Risk seviyesi : R36 / 37 / 38 , Güvenlik seviyesi : S23-24 / 25-36.
IPTG, -galaktosidaz aktivitesini tetiklemesi gereken klonlama deneylerinde yaygın olarak kullanılır. Rekombinant bakteri kolonilerinin mavi-beyaz taraması için genellikle X-Gal veya Bluo-Gal ile kombinasyon halinde kullanılır; bu, Chemicalbook tarafından E. coli'de lac operonunu eksprese etmek üzere indüklenebilir. IPTG, lacI baskılayıcı proteine bağlanır ve -galaktosidaz tarafından kodlanan lacZ geninin inhibisyonunu önlemek için konformasyonunu değiştirir.
IPTG, tam adı izopropil- -D-tiyogalaktosid, protein ekspresyonunu indüklemek ve düzenlemek için yaygın olarak kullanılan, yaygın olarak kullanılan bir indükleyicidir. Benzersiz yapısı ve işlevi nedeniyle IPTG genellikle kullanılarak hazırlanır.Iptg tozuLaboratuvarda sentez yöntemleri.
Sentetik Rota
1. Glikozit sentezi:
İlk sentez -D-tiogalaktozit genellikle glikozit sentezi yöntemiyle, galaktozun karşılık gelen bazlarla (izopropil gibi) yoğunlaştırılmasıyla sentezlenir. Bu adım, sonraki reaksiyonlarda yan ürünlerin-oluşmasını önlemek için koruyucu grupların kullanılmasını gerektirir.
2. Fosforilasyon reaksiyonu:
Glikozit sentezine dayanarak, izopropil grubu- -D-tiogalaktoz-5'-fosfat esteri elde etmek için fosfat grupları fosforilasyon reaksiyonu yoluyla eklenir. Bu adım, fosfatların ve karşılık gelen anhidritlerin veya asitlerin kullanımını gerektirir.
3. Korumanın kaldırılması grubu:
Korumanın kaldırılması grubu reaksiyonuyla, hedef ürün izopropil- - D-tiogalaktozidi elde etmek için glikozitteki koruyucu grup çıkarılır. Bu adım, reaksiyonu kolaylaştırmak için bir asit veya alkali çözeltisinin kullanılmasını gerektirir.
Deneysel adımlar:
Reaktifleri ve aletleri hazırlayın:
Gerekli şekerleri, bazları, koruyucu grupları, fosfatları, anhidritleri veya asitleri, çözücüleri ve diğer reaktiflerin yanı sıra karıştırıcılar, termometreler, spektrofotometreler vb. gerekli deney aletlerini hazırlayın.
Glikozitlerin sentezi:
Galaktozu bir çözücü içinde karşılık gelen bazlarla ısıtın ve karıştırın, bir katalizör ekleyin ve yoğunlaşma reaksiyonunu hızlandırın. Bu adım, reaksiyonun düzgün ilerlemesini sağlamak için sıcaklığın ve karıştırma süresinin sıkı kontrolünü gerektirir.
Fosforilasyon reaksiyonu:
Sentezlenen glikozitler ısıtılır ve bir solvent içerisinde fosfat, anhidrit veya asit ile karıştırılır ve fosforilasyon reaksiyonunu desteklemek için bir katalizör eklenir. Bu adım, reaksiyonun ilerlemesini ve ürünün oluşumunu sağlamak için çözücünün polaritesine ve dozajına dikkat ederken sıcaklığın ve karıştırma süresinin kontrol edilmesini gerektirir.
Korumanın kaldırılması grubu:
Hedef ürün izopropil- - D-tiyogalaktosidi elde etmek için koruyucu grubu bir asit veya alkali çözeltisi içinde fosforilasyon ürününden çıkarın. Bu adım, reaksiyonun ilerlemesini ve ürünün oluşumunu sağlamak için solventin polaritesine ve dozajına dikkat ederken pH değerinin ve sıcaklığın kontrol edilmesini gerektirir.
Ayırma ve saflaştırma:
Hedef ürün reaksiyon karışımından kolon kromatografisi, yeniden kristalleştirme ve diğer ayırma ve saflaştırma yöntemleri yoluyla ayrılır. Bu adım, ürünün saflığını ve verimini sağlamak için sıcaklık, solvent dozajı, akış hızı vb. çalışma koşullarına dikkat edilmesini gerektirir.
Analiz ve tanımlama:
Hedef ürünün yapısal tanımlanması nükleer manyetik rezonans ve kütle spektrometresi gibi analitik yöntemlerle gerçekleştirilir. Bu adım, ürünün yapısını ve saflığını doğrulamak için ilgili aletlerin, ekipmanların ve teknik araçların kullanılmasını gerektirir.
Iptg tozutam adı izopropil- - D-tiyogalaktosid, protein ekspresyonunu indüklemek ve düzenlemek için yaygın olarak kullanılan, yaygın olarak kullanılan bir indükleyicidir.
1. Protein ekspresyonu indüksiyonu:
IPTG, protein ekspresyonu indüksiyonunda önemli bir rol oynar. Bakterilerde spesifik genlerin ekspresyonunu etkili bir şekilde indükleyebilen, böylece istenen hedef proteini kısa sürede elde edebilen, yaygın olarak kullanılan bir indükleyicidir. Etki mekanizması bakterilerin lacI genine bağlanarak transkripsiyonel düzenleyici proteinin aktivitesini inhibe ederek bakterilerin lac operonunu açarak hedef genlerin ekspresyonunu başlatmaktır. Protein ekspresyonu için promotörler olarak laktoz operonları kullanıldığında, indükleyiciler gereklidir ve IPTG, Escherichia coli'de galaktosidaz ekspresyonunu indüklemek için bir laktoz analoğu olarak görev yapabilir. Sürekli ifadeyi sağlamak için hücreler tarafından kullanılamaz. IPTG lac'a bağlanır|ürünler, lacO'dan uzakta konformasyonel değişikliklere neden olur, böylece transkripsiyonu aktive eder. Bu uyarılabilir transkripsiyonel düzenleme, E. coli ekspresyon sistemi vektörlerinin yapımında yaygın olarak kullanılan bir unsur haline gelmiştir.
2. Gen ifadesi düzenlemesi:
IPTG, gen ekspresyonunun düzenlenmesinde önemli bir rol oynar. Önemli bir deneysel reaktif olarak gen ekspresyonu düzenlemesinde ve protein aşırı ekspresyonu deneylerinde önemli bir rol oynar. IPTG'nin ilave süresini ve konsantrasyonunu kontrol ederek hedef protein ekspresyonunun düzenlenmesi sağlanabilir. Bu düzenleyici etki IPTG'nin lac|Laktoz operonlarındaki ürünler konformasyonlarını değiştirerek lacO'yu bırakır ve transkripsiyonu daha da aktive eder. Bu indüklenebilir transkripsiyonel düzenleme mekanizması, IPTG'yi gen fonksiyonu, protein etkileşimleri ve ilaç taraması gibi araştırma alanlarında büyük önem taşımaktadır.
3. Protein kristalizasyonu:
Protein kristalizasyon deneylerinde IPTG, protein kristalizasyonunu teşvik etmek için bir indükleyici olarak kullanılır. Etki mekanizması, proteinlerdeki hidrofobik bölgelere bağlanarak proteinlerin konformasyonunu değiştirmek, böylece protein molekülleri arasında agregasyonu ve kristalleşmeyi teşvik etmektir. Bu toplanma ve kristalleşme süreci tersine çevrilebilir, dolayısıyla protein kristalizasyonu IPTG eklenerek başlatılabilir veya protein kristalleri IPTG çıkarılarak çözülebilir.
Protein kristalizasyon deneylerinde IPTG genellikle protein çözeltisine 1 mM'lik nihai konsantrasyon olarak eklenir. Bu düşük IPTG konsantrasyonu, proteinlerin aşırı indüksiyonunu önleyebilir, böylece daha iyi kristalizasyon etkileri elde edilebilir. Aynı zamanda IPTG, proteinlerin doğru katlanmasına ve toplanmasına yardımcı olmak ve böylece daha tekdüze protein kristalleri elde etmek için moleküler bir şaperon görevi de görebilir.
IPTG'nin her durumda protein kristalleşmesini desteklemediğine dikkat edilmelidir. Bazı proteinler IPTG'ye duyarlı değildir veya doğal yapıları ve kristalizasyona uygun olmayan özellikleri nedeniyle, optimum kristalizasyon koşullarını ve yöntemlerini belirlemek için farklı proteinler için deneysel doğrulama ve optimizasyona ihtiyaç vardır.
Olumsuz reaksiyonlar
Sitotoksisite
Prokaryotik hücrelere yönelik toksisite
Her ne kadar IPTG yaygın olarak prokaryotik hücrelerde gen ekspresyonunu indüklemek için kullanılsa da, yüksek IPTG konsantrasyonları prokaryotik hücreler üzerinde toksik etkilere sahip olabilir. Araştırmalar, IPTG konsantrasyonu çok yüksek olduğunda hücrelerdeki normal metabolik süreçlere müdahale edebildiğini göstermiştir. Örneğin hücrelerin enerji metabolizmasını etkileyebilir, glikoliz ve trikarboksilik asit döngüsü gibi yolaklara müdahale ederek hücre içi ATP üretiminde azalmaya neden olabilir ve hücre büyümesini ve çoğalmasını etkileyebilir. Ayrıca IPTG'nin yüksek konsantrasyonları hücre zarının bütünlüğüne zarar verebilir, geçirgenliğini artırabilir, hücre içi maddelerin sızmasına neden olabilir ve hücre dışı ortamdan zararlı maddelerin hücreye girmesine izin vererek hücre ölümüne neden olabilir. Deneyler, Escherichia coli'nin yüksek konsantrasyonlarda IPTG içeren bir ortamda kültürlendiğinde, bakterinin büyüme hızının önemli ölçüde yavaşladığını ve yetiştirme süresinin uzamasıyla birlikte canlı bakteri sayısının kademeli olarak azaldığını bulmuştur. Bu, yüksek IPTG konsantrasyonlarının Escherichia coli üzerinde belirli bir engelleyici ve öldürücü etkiye sahip olduğunu gösterir.
Ökaryotik hücrelere yönelik toksisite
IPTG, prokaryotik hücrelerin yanı sıra ökaryotik hücreler için de toksik olabilir. Ökaryotik hücreler ile prokaryotik hücreler arasında yapı ve fonksiyon açısından belirli farklılıklar vardır ancak IPTG, çeşitli yollardan ökaryotik hücrelerin normal fizyolojik fonksiyonlarını hala etkileyebilir. Bir yandan IPTG, ökaryotik hücreler içindeki sinyal iletim yollarına müdahale edebilir. Hücrelerdeki sinyal iletimi, büyüme, farklılaşma ve apoptoz gibi süreçlerde çok önemli bir düzenleyici rol oynar. IPTG, hücreler içindeki belirli sinyal molekülleri ile etkileşime girerek sinyal iletiminin yoğunluğunu ve yönünü değiştirebilir, böylece hücrelerin normal fizyolojik aktivitelerini etkileyebilir.
Ökaryotik hücrelere yönelik toksisite
Öte yandan IPTG, ökaryotik hücrelerde oksidatif stres tepkisini indükleyebilir. Oksidatif stres, hücre içi oksidasyon ile antioksidan aktivite arasındaki dengesizliği ifade eder ve reaktif oksijen türlerinin (ROS) üretiminde artışa yol açar. Aşırı ROS, hücre içindeki DNA, proteinler ve lipitler gibi biyomoleküllere saldırarak hücresel hasara ve fonksiyonel bozulmaya neden olabilir. Araştırma, belirli koşullar altında ökaryotik hücrelerin IPTG tedavisinin, hücre canlılığında bir azalma ve apoptoz oranında bir artışla birlikte hücre içi ROS seviyelerini önemli ölçüde arttırdığını bulmuştur. Bu, IPTG'nin oksidatif stres tepkisini indükleyebileceğini ve ökaryotik hücreler üzerinde toksisite uygulayabileceğini göstermektedir.
Popüler Etiketler: iptg tozu cas 367-93-1, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toptan satış, satın al, fiyat, toplu, satılık