Uzun R3 IGF-I(bağlantı:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/long-r3-igf-i-cas-143045-27-6.html), keşif tarihi 1970'lerde başlayan sentetik bir polipeptit molekülüdür. O dönemde araştırmacılar, endojen insülin benzeri büyüme faktörü-I'in (IGF-I) büyüme ve metabolizmayı kontrol etmedeki önemli rolüne dikkat etmeye başladılar ve IGF-I'e benzer ancak daha biyolojik ve farmasötik bir moleküler yapı tasarlamaya çalıştılar. Uygulama değerine sahip yeni bir peptit molekülü türü.
1. IGF-I'in keşfi ve araştırması:
1950'lerin başlarında, araştırmacılar insülin benzeri büyüme faktörlerinin varlığını ve işlevini keşfetmeye başladılar. 1960'larda bazı araştırma kuruluşları, büyüme hormonu (GH) adı verilen hayvan serumundan hücre çoğalması ve büyümeyi teşvik edici aktiviteye sahip yeni bir protein türü izole etti. Daha sonra araştırmacılar, hayvan serumu ve diğer dokulardan elde edilen, IGF-I adı verilen, BH ile yakından ilişkili başka bir protein keşfettiler.
IGF-I, 70 amino asit kalıntısından oluşan küçük moleküler bir proteindir ve yapısı insan insülinine benzer. IGF-I esas olarak BH'nin fizyolojik etkileriyle yakından ilişkili olan ve kendi reseptörleri ile insülin benzeri büyüme faktörü reseptörü (IGF-IR) arasındaki etkileşim yoluyla hücre proliferasyonunu, farklılaşmasını ve metabolizmasını düzenleyebilen karaciğer tarafından sentezlenir.
1970'lerde IGF-I ile ilgili araştırmalar derinleştikçe, araştırmacılar moleküler yapısını ve biyolojik özelliklerini keşfetmeye başladılar ve daha değerli bir IGF-I analog molekülü geliştirmeye çalıştılar.
2. Uzun R3 IGF-I'in keşfi ve araştırması:
1970'lerin sonlarından 1980'lerin başına kadar, bazı araştırmacılar IGF-I'in N-terminal dizisini değiştirmeye başladılar ve daha kararlı bir moleküler yapıya ve daha kolay sentez ve kullanıma sahip bir IGF-I analoğu tasarladılar. Bu temelde, uzun R3 IGF-I doğdu.
Uzun R3 IGF-I, endojen IGF-I'in Gln-Pro-Arg-Gly dizisini değiştirmek için arabinosil-Ala-Pro-Ala (Apa) kullanır, bu da plazmada daha uzun bir yarı ömür sağlar ve Kolayca bağlanmaz ve temizlenmez. IGF bağlayıcı protein (IGFBP). Ek olarak, uzun R3 IGF-I, C-terminusa 13 amino asit sekansı (Arg-Lys-Glu-Gly-Ser dahil) eklenerek, disülfit bağları ve -helikal yapılar vb. eklenerek modifiye edildi, böylece daha yüksek bir biyolojik aktiviteye ve farmasötik uygulama potansiyeline sahiptir.
Uzun R3 IGF-I'in araştırılması ve geliştirilmesi sırasında, bazı araştırmacılar ayrıca transgenik teknoloji ve diğer yollarla ekspresyon etkinliğini ve üretim maliyetini iyileştirmeye çalıştı. Örneğin, uzun R3 IGF-I, Escherichia coli ve maya gibi mikrobiyal sistemler tarafından eksprese edildi ve asit muamelesi, karşı akım kromatografisi ve diğer teknolojilerle saflaştırıldı ve ayrıldı ve son olarak yüksek saflıkta bir uzun R3 IGF-I ürünü elde edildi.
Uzun araştırma sürecinde endojen IGF-I'e yapı olarak benzer bir polipeptit molekülü olan ve ilave 13 amino asit içeren LONG R3 IGF-I'in özel yapısına göre üretimi için çeşitli sentez yöntemleri denenmiştir. Uzun R3 IGF-I'in hazırlanma süreci temel olarak aşağıdaki yöntemlere sahiptir:
1. Kimyasal sentez yöntemi:
Kimyasal sentez, uzun R3 IGF-I hazırlamak için en yaygın kullanılan yöntemlerden biridir. Uzun R3 IGF-I'in kimyasal sentezi, IGF-I'in bilinen amino asit dizisine ve uzun R3 IGF-I'in N-terminaline ilave 13 amino asit dizisine dayanılarak gerçekleştirildi. Sentez, amino asit seçiciliğini ve reaksiyon etkinliğini sağlamak için çoklu koruma gruplarının kullanılmasını gerektirir. Genellikle, hedef amino asidin korumalı peptit segmenti önce katı faz sentezi ile hazırlanır ve ardından sıvı faz sentezi ile uzun bir R3 IGF-I molekülü halinde birleştirilir.
2. Biyoteknoloji Yasası:
Biyoteknoloji yöntemi, esas olarak rekombinant proteinleri ifade etmek için tasarlanmış hücreleri kullanır ve gen dizilerini ve ifade vektörlerini değiştirerek LONG R3 IGF-I'i ifade eder. Bu yöntemde LONG R3 IGF-I geni, gen rekombinasyon teknolojisi, lentiviral vektör, plazmit vektörü ve benzerleri ile ekspresyon için konakçı hücreye dahil edilebilir. Bu yöntem, büyük miktarda LONG R3 IGF-I üretebilir ve ayrıca vektörü ve salgılama sinyali dizisini değiştirerek ekspresyonunu ve saflaştırma etkisini optimize edebilir.
3. Enzimatik yöntem:
Enzimatik yöntem, gereksiz yan ürünlerden kaçınırken LONG R3 IGF-I monomerini elde etmek için uzun R3 IGF-I öncü proteinini parçalamak için temel olarak pepsin ve istiridye kası enzimi gibi spesifik enzimleri kullanır. Bu yöntemde, önce uzun R3 IGF-I öncü proteinini içeren matrisin elde edilmesi ve ardından LONG R3 IGF-I hedef maddesini elde etmek için enzimler ve pH kontrolü vb. eklenerek uygun bir sıcaklıkta reaksiyona sokulması gerekir.
4. Protein modifikasyon yöntemi:
Protein modifikasyon yöntemi, esas olarak, uzun R3 IGF-I'in etkisini elde etmek üzere modifiye etmek için sentezlenmiş endojen IGF-I'i kullanır. Bu yöntemde, endojen IGF-I'in N-terminali, uzun R3 IGF-I'in etkisine sahip olması için genellikle 13 spesifik sekansa sokulur. Ek olarak, uzun R3 IGF-I'in biyolojik aktivitesi ve yarı ömrü, C-terminal grubu değiştirilerek daha da iyileştirilebilir.
Özetlemek gerekirse, uzun R3 IGF-I'in sentez yöntemleri arasında kimyasal sentez, biyoteknoloji, enzimatik ve protein modifikasyonu yer alır ve her yöntemin avantajları, dezavantajları ve uygulama kapsamı vardır. Kimyasal sentez teknolojisinin, genetik mühendisliği teknolojisinin ve diğer alanların sürekli gelişmesiyle, uzun R3 IGF-I'in hazırlama teknolojisi de daha da geliştirilecek ve geliştirilecektir.